Cytotoxic and genotoxic potential of Ginkgo biloba L, in industrialized and without-additive forms / Potencial citotóxico e genotóxico de Ginkgo biloba L, nas formas industrializada e não aditivada

The toxic potential at the cellular level of industrialized Ginkgo biloba L. leaves was evaluated in meristematic cells of Allium cepa at concentrations of 0.1; 0.2 and 0.4 mg/ml. The industrialized products, from four pharmaceutical laboratories, were identified as A, B, C and D. Cell-level toxicity of dehydrated ginkgo leaf tea was also evaluated at concentrations of 0.15; 0.30 and 0.60 mg/ml. Dehydrated products were purchased from herbalists certified by ANVISA. The roots were exposed to teas and processed products for 24 and 48 hours. The results were submitted to the Chi-square test at 5%. However, industrialized ginkgo products at all concentrations caused antiproliferative effect. Also, the products purchased in pharmacies did not induce significant changes to root meristems. Therefore, industrialized ginkgo promoted cytotoxicity, however, they were not genotoxic to the bioassay used.

Avaliou-se, em células meristemáticas de raízes de Allium cepa, o potencial tóxico em nível celular de folhas de Ginkgo biloba L. industrializadas, nas concentrações 0,1; 0,2 e 0,4 mg/mL. Os produtos industrializados, oriundos de quatro laboratórios farmacêuticos, foram identificados como A, B, C e D. Também avaliou-se a toxicidade em nível celular de chás de folhas de ginkgo desidratadas, nas concentrações 0,15; 0,30 e 0,60 mg/mL. Os produtos desidratados foram adquiridos em ervanários certificados pela ANVISA. As raízes ficaram expostas aos chás e produtos industrializados por 24 e 48 horas. Os resultados obtidos foram submetidos ao teste Qui-quadrado, a 5%. No entanto, os produtos de ginkgo industrializados, em todas as concentrações, causaram efeito antiproliferativo. Ainda, os produto adquiridos em farmácias não induziram alterações em número significativo aos meristemas de raízes. Portanto, os ginkgos industrializados promoveram citotoxicidade, porém, não foram genotóxicos frente ao bioensaio utilizado.

Industrial milk powder in bioassays for evaluation of cytotoxicity and genotoxicity / Leites industrializados, tipo em pó, frente a bioensaios de avaliação de citotoxicidade e genotoxicidade

Considering the widespread consumption of milk powder by the general population as well as the lack of studies on the toxicity of such industrialized foods, this study evaluated the cytotoxic and genotoxic potential of powdered milk from four reputed companies in the food market of Brazil and other South American countries. Milk samples were evaluated in root meristem cells of Allium cepa L., at concentrations of 0.065 and 0.13 g/mL, for 24 and 48 hours of exposure; and by means of cell viability in culture of cells of normal lineage, via MTT test, for 24 hours, at concentrations of 0.016; 0.032; 0.065 and 0.13g/mL. The concentration 0.13 g/mL was the one suggested for consumption in all milk packages evaluated in this study. In A. cepa, we observed that the milks, at both concentrations and at the two exposure times investigated, reduced the cellular proliferation of root meristems demonstrating a significant cytotoxicity. Furthermore, 0.13g/mL milks at the exposure time of 24h induced an expressive frequency of cellular alterations in the plant tissue, showing to be genotoxic. In the in vitro evaluation, three milks at 0.065 g/mL and all milks at 0.13 g/mL have significantly reduced cell viability, proving to be cytotoxic to the analyzed cell culture. Therefore, under the studied conditions, the powdered milks evaluated caused significant genetic instability to the cells of the test systems used.

Devido o amplo consumo de leite em pó pela população em geral, bem como, a carência de estudos sobre a toxicidade de tais alimentos industrializados, objetivou-se na presente pesquisa avaliar o potencial citotóxico e genotóxico de leites em pó provenientes de quatro empresas de reconhecida atuação no mercado de alimentos brasileiro e de outros países da América do sul. As amostras de leite foram avaliadas em células meristemáticas de raízes de Allium cepa L., nas concentrações 0,065 e 0,13g/mL, por 24 e 48 horas de exposição; e por meio da viabilidade celular em cultura de células de linhagem normal, via teste MTT, por 24 horas, nas concentrações 0,016; 0,032; 0,065 e 0,13g/mL. A concentração 0,13 mL/kg foi a sugerida para consumo em todas embalagens de leites avaliados neste estudo. Em A. cepa, verificou-se que os leites, nas duas concentrações e nos dois tempos de análise considerados, reduziram a proliferação celular dos meristemas de raízes demonstrando citotoxicidade significativa. Ainda, os leites na concentração 0,13g/mL induziram, no tempo de exposição 24h, frequência expressiva de alterações celulares ao tecido vegetal, mostrando-se genotóxicas. Na avaliação in vitro, três leites na concentração 0,065g/mL e todos na concentração 0,13g/mL reduziram significativamente a viabilidade celular mostrando-se citotóxicos a cultura de células analisada. Portanto, nas condições de estudo estabelecidas, os leites em pó avaliados causaram significativa instabilidade genética as células dos sistemas testes utilizados.

Toxicity at the cellular level of artificial synthetic flavorings / Toxicidade em nível celular de aromatizantes sintéticos artificiais

The goal of the present study was to evaluate the cytotoxicity and genotoxicity of artificial synthetic flavoring agents cookie and tutti-frutti. To this end, root meristem cells of Allium cepa L. were exposed to these substances in exposure times of 24 and 48 hour using individual doses of 0.3; 0.6 and 0.9 mL and doses combined as follows: 0.3 mL + 0.3 mL; 0.6 mL and 0.9 mL + 0.6 mL + 0.9 mL. After applying the treatments, root meristems were fixed, hydrolyzed, stained and analyzed a total of 5,000 cells using an optical microscope to evaluate each dose and combined treatment. All three doses of cookie flavoring and combined treatments significantly inhibited cell division of the tissue studied. Doses of tutti-frutti caused no change in cell division rate. In addition, doses of both flavorings and treatments combining these solutions induced cell aberrations in a significant number of cells to the A. cepa system. Therefore, under these analytical conditions, cookie flavoring and combined doses were cytotoxic and genotoxic, and tutti-frutti flavoring, although non-cytotoxic, demonstrated genotoxic action.

Objetivou-se neste trabalho avaliar a citotoxicidade e a genotoxicidade de aditivos aromatizantes sintéticos artificiais de biscoito e tutti-frutti. Essa avaliação se deu por meio das células meristemáticas de raízes de Allium cepa L., nos tempos de exposição de 24 e 48 horas, em que estas substâncias foram analisadas individualmente, nas doses de 0,3; 0,6 e 0,9 mL, e associadas entre si, da seguinte forma: 0,3 mL + 0,3 mL; 0,6 mL + 0,6 mL e 0,9 mL + 0,9 mL. Os meristemas de raízes foram fixados, hidrolisados e corados, e em seguida analisados em microscópio óptico, no qual se avaliou para cada dose e tratamento associado um total de 5.000 células. A partir dos resultados obtidos verificou-se que as três doses do aromatizante de biscoito e os tratamentos em associação inibiram significativamente a divisão celular dos tecidos em estudo. Já as doses de tutti-frutti não alteraram o índice de divisão celular das raízes em questão. Verificou-se também que as doses dos dois aromatizantes e os tratamentos em associação, induziram aberrações celulares em número significativo. Portanto, nestas condições de análise, o aditivo de biscoito e as doses associadas foram citotóxicos e genotóxicos, e o de tutti-frutti, apresentou apenas ação genotóxica.

Efeito de metabólitos produzidos por Trichoderma spp. sobre o índice mitótico em células das pontas de raízes de Allium cepa / Effect of metabolites produced by Trichoderma spp. on mitotic index in cells of Allium cepa root tips

Microrganismos do solo produzem metabólitos importantes para a produção de compostos biologicamente ativos. Dentre estes microrganismos, as espécies de trichoderma (Trichoderma spp.) possuem a capacidade de produzir metabólitos. A promoção do desenvolvimento de plantas por trichoderma pode estar relacionada, entre outros fatores, ao estimulo à multiplicação celular, através da produção de hormônios, entre outros. O método de avaliação do índice mitótico em raízes de Allium cepa é validado pelo Programa Internacional de Segurança Química (IPCS, OMS) e o Programa Ambiental das Nações Unidas (UNEP) como um eficiente teste para análise e monitoramento in situ. O objetivo do estudo foi selecionar cepas e produtos biológicos comerciais de trichoderma, utilizados no controle biológico de fitopatógenos que promovam o aumento do índice mitótico em células de pontas de raízes pelo sistema teste de A. cepa. Foram utilizadas cepas de Trichoderma harzianum (2B2, 2B22, 2B12); Trichoderma viride (TSM1, TSM2, C1) e os produtos biológicos comerciais de trichoderma, Agrotrich® e Trichodermil®. Os bulbos de Allium cepa foram arranjados em dez tratamentos (quatro repetições por tratamento), oito com metabólitos de cepas de Trichoderma spp. e dois controles na ausência de metabólitos. A contagem das células ocorreu na região meristemática, onde foram contadas 500 células por bulbo em cada uma das lâminas. Foram observadas as células em interfase, prófase, metáfase, anáfase e telófase, com auxílio de microscópio ótico com a objetiva de 40X. Foram contadas as células de cada uma das fases do ciclo celular estudadas, após calculou-se os índices mitóticos. A análise estatística dos dados foi realizada pelo teste c 2 (Qui-quadrado), com probabilidade de 5%, pelo programa estatístico BioEstat 4.0. Os tratamentos T1, T3 e T4 (metabólitos das cepas 2B2, 2B12 e C1 de trichoderma, respectivamente) apresentaram os maiores números de células para as fases prófase, metáfase, anáfase e telófase e alcançaram os maiores IM (c 2= 5.45 a= 0.05), (c 2= 5.0 a= 0.05) e (c 2= 3.92 a= 0.05), respectivamente. O tratamento controle T10 (meio líquido BD), apresentou o maior número de células em interfase, e o menor nas fases da divisão celular. O teste com raízes de Allium cepa possibilita selecionar cepas de trichoderma que induzem o aumento do índice mitótico em pontas de raízes pela ação de metabólitos e apresenta variabilidade entre as cepas estudadas.

Soil microorganisms produce metabolites important for the production of biologically active compounds. In relation to these organisms, species of trichoderma (Trichoderma spp.) have the ability to produce metabolites. Promoting the development of plants by trichoderma may be related, among other factors, to stimulate cell proliferation through the production of hormones, among others. The method of evaluation of mitotic index in Allium cepa roots is validated by the International Programme on Chemical Safety (IPCS, WHO) and United Nations Environment Programme (UNEP) as an effective test for in situ analysis and monitoring. The aim of the study was to select strains and commercial biological products trichoderma used in biological control of plant pathogens that promote increased mitotic index in cells of the root tips of A. cepa test system. Strains of Trichoderma harzianum (2B2, 2B22, 2B12) and Trichoderma viride (TSM1, TSM2, C1) and the biological products commercials Agrotrich® and Trichodermil® of trichoderma were used. The bulbs of Allium cepa were arranged in ten treatment (four replicates per treatment), eight with metabolite of Trichoderma spp. and two controls in the absence of metabolites. Cell counts occurred on the meristematic region where 500 cells were counted for each bulb on the blades. Cells were observed in interphase, prophase, metaphase, anaphase and telophase, with the aid of an optical microscope with a 40X objective. The cells were counted in each phase of the cell cycle analyzed and after it was calculated mitotic rates. Statistical analysis of data was performed by c 2 test (chi-square), with a probability of 5%, the statistical program BioEstat 4.0. Treatments T1, T3 and T4 (metabolites of isolates 2B2, 2B12 and C1 of trichoderma, respectively) showed higher cell numbers for the phases prophase, metaphase, anaphase and telophase and reached the highest IM (c 2= 5.45 a= 0.05), (c 2= 5.0 a= 0.05) e (c 2= 3.92 a= 0.05, respectively. The T10 control (liquid medium BD), had the highest number of interphase cells, and the lower phases of cell division. The test with Allium cepa roots enables selecting trichoderma isolates that induce increased mitotic index in root tips by the action of metabolites and shows variability among the isolates studied.

Action of Ponceau 4R (E-124) food dye on root meristematic cells of Allium cepa L / Ação do corante alimentar Ponceau 4R (E-124) sobre as células meristemáticas de raízes de Allium cepa L

This study aimed to evaluate the toxicity of Ponceau 4R food dye on the cell cycle in root meristematic cells of Allium cepa L. at three concentrations: 0.25, 0.50 and 0.75 g L-1, at exposure times of 24 and 48 hours. For each concentration, we used a set of five onion bulbs that were first rooted in distilled water and then transferred to their respective concentrations. Radicles were collected and fixed in acetic acid (3:1) for 24 hours. The slides were mounted with the crushing technique and stained with 2% acetic orcein. Cells were analyzed throughout the cell cycle, totaling 5,000 cells for each control and exposure time. The calculated mitotic indices were subjected to the Chi-square test (p < 0.05). From the results, we observed that the concentrations of 0.25 and 0.50 g L-1 at the 48-hour exposure, and the concentration of 0.75 g L-1, the two exposure times time significantly reduced (p < 0.05) the cell division rate. Importantly, all the three concentrations at the two exposure times tested caused cellular aberrations in significant numbers in this testing system. Therefore, under the conditions studied, the Ponceau 4R was cytotoxic.

Este trabalho teve por objetivo avaliar a toxicidade do corante alimentar Ponceau 4R sobre as células meristemáticas de raízes de Allium cepa L., em três concentrações: 0,25; 0,50 e 0,75 g L-1, nos tempos de exposição de 24 e 48 horas. Para cada concentração utilizou-se um grupo de cinco bulbos de cebolas, que primeiramente foram enraizados em água destilada, e em seguida transferidos para as suas respectivas concentrações. As radículas foram coletadas e fixadas em ácido acético (3:1) por 24 horas. As lâminas foram preparadas pela técnica de esmagamento e coradas com orceína acética a 2%. Analisaram-se células em todo ciclo celular, totalizando 5.000 para cada controle e tempo de exposição. Os índices mitóticos calculados e as aberrações celulares observadas foram submetidos à análise estatística do Qui- quadrado (p < 0,05). A partir dos resultados observou-se que as concentrações 0,25 e 0,50 g L-1, no tempo de exposição de 48h, e a concentração 0,75 g L-1, nos dois tempos de exposição avaliados reduziram de forma significativa (p < 0,05) o índice de divisão celular do sistema teste em questão. Observou-se também que todas as três concentrações, nos dois tempos de exposição analisados, ocasionaram aberrações celulares em número significativo a este sistema teste. Portanto, nas condições analisadas, o Ponceau 4R foi citotóxico.

Análise preliminar da citotoxicidade dos aditivos alimentares urucum e cúrcuma / Cytotoxicity of the food additive annatto and turmeric

Este trabalho teve por objetivo avaliar a ação dos aditivos alimentares urucum e cúrcuma em células meristemáticas de pontas de raízes de Allium cepa nas doses de 5 e 10 g, nos tempos de exposição de 24 e 48 horas. Utilizou-se para cada dose um grupo de cinco bulbos de cebolas, que primeiramente foram enraizados em água destilada, e em seguida transferidos para as suas respectivas doses. Analisaram-se células em todo ciclo celular, totalizando 5.000 para cada controle e tempo de exposição. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística do Qui-quadrado (p<0,05). A partir dos resultados observou-se que as doses do urucum e do cúrcuma tiveram efeito antiproliferativo significativo sobre o ciclo celular deste sistema-teste. Também foi verificado número significativo de aberrações celulares nos dois tempos de exposição avaliados de todas as doses estudadas. Portanto, nas condições analisadas, o urucum e o cúrcuma mostraram-se citotóxicos e genotóxicos.

This study aimed to evaluate the effect of food additives annatto and turmeric tip cells of Allium cepa roots in doses of 5 or 10 g in exposure times of 24 and 48 hours. A group of five onion bulbs was used for each dose. Each dose was first embedded in distilled water and then transferred to their respective doses. Cells were analyzed throughout the cell cycle, totaling 5000 for each control and exposure time. The obtained data were subjected to statistical analysis Chi-square (p <.05). From the results it was observed that the doses of turmeric and annatto had significant antiproliferative effect on the cell cycle of this test system. They also found a significant number of cellular aberrations in the two exposure times evaluated all doses studied. Therefore, under the conditions studied, annatto and turmeric proved cytotoxic and genotoxic.